Categorización de estructuras ováricas : relación con el porcentaje de recuperación ovocitaria, maduración y desarrollo embrionario in vitro en la especie bovina

Abstract

Resumen: El objetivo de la siguiente investigación fue analizar la relación entre la morfología del ovario y la presencia de ciertas estructuras ováricas (folículo dominante, cuerpo lúteo), y la producción in vitro de embriones. A través de dos experimentos se buscó evaluar el efecto de la clasificación anatómica del ovario en (a) el número y la calidad de ovocitos recuperados mediante la técnica de punción folicular, y en (b) la maduración in vitro y desarrollo embrionario luego de la activación partenogenética. La clasificación anatómica se basó en tres categorías ováricas distinguidas por presencia o ausencia de ciertas estructuras ováricas y por diámetro folicular: (1) CL con presencia de cuerpo lúteo y folículos de diámetro ≤ 8 mm, (2) PRO en etapa de proestro, folículos en crecimiento y de diámetro ≤ 8 mm, (3) DOM con presencia de folículo dominante de diámetro ≥ 15 mm. Se trabajó con 2.583 ovocitos provenientes de ovarios de frigorífico de vacas y vaquillonas en diferentes estados fisiológicos. Los resultados obtenidos reflejaron que los ovocitos provenientes de ovarios categoría PRO presentaron el mayor porcentaje de recuperación ovocitaria (51,44%) y el mayor porcentaje de ovocitos grado 1 y 2 (66.33%), es decir los de mejor calidad, citoplasma compacto, mayor número de capas de células del cúmulus. Respecto del porcentaje de maduración no hubo diferencias significativas entre las tres categorías ováricas (P-valor = 0,1739). Finalmente, sí se observaron diferencias en el desarrollo a blastocistos. La categoría PRO fue significativamente mayor respecto de la categoría DOM, no habiendo diferencias entre dichas categorías y la categoría CL. Se pudo demostrar que, bajo condiciones de cultivo semejantes, los ovocitos provenientes de ovarios DOM presentaron una calidad inferior para evolucionar hasta el estadio de blastocistos cuando se los compara con aquellos provenientes de la categoría PRO, pudiendo deberse al efecto inhibitorio que ejerce el folículo dominante sobre el resto de los folículos.

Abstract: The aim of this investigation was to analyze the relationship between morphological classification of the ovary and the presence of anatomical structures as dominant follicle or corpus luteum, and in vitro embryo production. Two experiments were conducted to assess the effect of anatomical classification of the ovary and (a) the number and quality of oocytes recovered by aspiration method, and (b) and in vitro maturation and embryo development after parthenogenetic activation. Ovaries were divided into three morphological classes based on the presence or absence of certain ovarian structures and follicles diameter: (1) CL bearing a corpus luteum and follicles of ≤ 8 m m diameter, (2) PRO ongoing proestro stage with growing follicles of ≤ 8 mm diameter, (3) DOM with a dominant follicle of ≥ 15 mm diameter. After aspiration, cúmulus-oocyte complexes were classified according to morphological criteria into 5 grades. Grade 1 and 2 were destined to in vitro maturation regarding its higher quality, homogeneous cytoplasm and compact cúmulus with more than 5 layers. There were 2.583 oocytes recovered from slaughterhouse ovaries from cows and heifers in different estrous stages. The present results demonstrated that oocytes from PRO-ovaries showed the highest percentage of oocyte recovery (51,44%) and quality (66.33%). There were no differences in the percentage of in vitro maturation among the three ovarian classes (P-value = 0,1739). Differences were found in embryo development as oocytes from PROovaries showed higher percentages of blastocysts than oocytes from DOMovaries. Nevertheless, there were no differences in blastocysts rates between both previous categories and oocytes from CL-ovaries. The results showed that under the same in vitro conditions, oocytes from DOM-ovaries had lower developmental competences to reach blastocyst stage tan oocytes from PRO-ovaries, probably due to the inhibitory effects of the dominant follicle over the rest of follicles.