Evaluación de la sobrevida y funcionalidad in vitro en plaquetas criopreservadas

Abstract

Introducción: En la actualidad, las plaquetas constituyen un recurso importante debido a su amplio margen de uso en el campo de la medicina transfusional. Bajo las condiciones de conservación vigentes su vida útil oscila entre 5 a 7 días, esto ha motivado la creación de estrategias que permitan prolongar el tiempo de sobrevida para este hemocomponente. Objetivo: Prolongar la supervivencia y funcionalidad de las plaquetas criopreservadas hasta 28 días manteniendo una viabilidad igual o mayor al 50% respecto de las plaquetas conservadas en forma convencional. Métodos: Se evaluó una muestra de plaquetas en aféresis, distribuidas en 3 grupos según la solución criopreservante utilizada: DMSO5%+2%albúmina; DMSO5%+NaCl0,9% y DMSO5%+Dextrosa2%. Luego se congelaron a -80°C y se descongelaron a los 7, 14 y 28 días. La supervivencia y la viabilidad se evaluaron mediante el recuento de plaquetas post- descongelación y los porcentajes de tinción de CD41, CD61 y CD42a mediante citometría de flujo. La funcionalidad se determinó con el porcentaje de agregación post-estimulación con trombina 1nM utilizando el agregómetro Chromo-Log490. El grupo de control (GC) consistió en plaquetas frescas bajo agitación constante a 22°C.

Introduction: Currently, platelets constitute an important resource due to their wide range of use in the field of transfusion medicine. Under current conservation conditions, its useful life ranges between 5 to 7 days. This has motivated the creation of strategies that allow prolonging the survival time for this blood component. Objective: Prolong the survival and functionality of cryopreserved platelets up to 28 days while maintaining viability equal to or greater than 50% compared to conventionally preserved platelets. Methods: A sample of platelets was evaluated in apheresis, distributed into 3 groups according to the cryopreservative solution used: DMSO5%+2%albumin; DMSO5%+NaCl0.9% and DMSO5%+Dextrose2%. They were then frozen at -80°C and thawed after 7, 14 and 28 days. Survival and viability were assessed by post-thaw platelet count and percentages of CD41, CD61, and CD42a staining by flow cytometry. Functionality was determined with the percentage of aggregation post-stimulation with 1nM thrombin using the Chromo-Log490 aggregometer. The control group (CG) consisted of fresh platelets under constant agitation at 22°C.