Establecimiento de preñeces equinas mediante colapso y vitrificación de blastocistos expandidos (> 900 μm) con un sistema novedoso de punción con microaguja en micropocillos

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Datos generales

Título del Proyecto
Establecimiento de preñeces equinas mediante colapso y vitrificación de blastocistos expandidos (> 900 μm) con un sistema novedoso de punción con microaguja en micropocillos
Coordinador del Proyecto
Organizaciones participantes
 
Fecha de Inicio
01-03-2020
Fecha de finalización
01-03-2022
 
Equipo de trabajo
Responsables

Descripción

La criopreservación del embrión equino es una herramienta importante para el diferimiento de las transferencias embrionarias y la comercialización de genética de alto valor comercial. Los reportes de preñeces logradas con embriones de diámetros ≥300μm son escasos 1,2. Debido a que el lavaje (d 7-9 post-inseminación) resulta generalmente en blastocistos de gran volumen (500-2000 μm), es necesario un colapso total o parcial del blastocele para evitar cristalización durante el proceso de vitrificación. Este colapso, generalmente realizado mediante equipamiento complejo de micromanipulación, es de difícil implementación en condiciones de campo.

El objetivo de éste ensayo preliminar es desarrollar un sistema de reducción de volumen sencillo y efectivo, que permita el colapso del embrión equino previo a la vitrificación. Para este ensayo, se utilizarán embriones (8 días post-inseminación) de yeguas de polo y receptoras con buen estado corporal. Los embriones serán asignados aleatoriamente: 1) colapso tradicional con microscopio y micromanipulador (tratamiento MM) y 2) colapso con sistema novedoso de inmovilización en micropocillos, punción con microaguja para diabéticos (NovoFine™ Diamond Needle, 32g) seguido de pipeteado en microcapilar (tratamiento MP). Los embriones colapsados serán vitrificados en solución de 20% DMSO, 20% glicerol y 0.65M trehalosa en Cryoleaf ™ (Origio; Denmark), almacenados durante 5 a 12 meses a -196°C; luego calentados y transferidos a receptoras para evaluar las tasas de preñez y desarrollo. Este sistema novedoso permitiría el colapso y establecimiento de preñeces en embriones equinos de gran volumen, representado una alternativa para implementación a condiciones de campo.
 
Palabras Clave
Equino
Vitrificación
Blastocito
Colapso
Preñez